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轉(zhuǎn)基因骨髓間充質(zhì)干細胞結合支架修復退變椎間盤技術
編號:
名稱: 轉(zhuǎn)基因骨髓間充質(zhì)干細胞結合支架修復退變椎間盤技術
領域: 生物醫(yī)用
成果形式:
投資額:
案例數(shù): 2-5家
技術階段: 小批量階段
合作方式: 技術許可,其他

方案詳述

已成功構建Ad-GDF-5和Ad-GFP;已成功構建小腸粘膜下層和殼聚糖-聚己酸內(nèi)酯支架;


目前已完成動物椎間盤退變模型的制作,間充質(zhì)干細胞的提取,分離,培養(yǎng)和鑒定;


已制備轉(zhuǎn)基因MSCs,完成轉(zhuǎn)基因MSCs的細胞特性,其和支架之間的相互影響。

技術優(yōu)勢

主要技術指標:



1)、重組腺病毒Ad-GDF-5以及對照空載腺病毒Ad-GFP制備的檢測采用PCR、熒光顯微鏡、western-blot方法;


(2)、采用相應物理化學工藝處理材料制備小腸粘膜下層和殼聚糖-聚己酸內(nèi)酯支架,采用電子顯微鏡觀測;


(3)、間充質(zhì)干細胞(MSCs)的采集,培養(yǎng)和鑒定,運用特定抗體采用流式細胞術鑒定;


(4)、用Ad-GDF-5和Ad-GFP分別轉(zhuǎn)染MSCs得到轉(zhuǎn)基因MSCs,熒光顯微鏡、熒光計數(shù)器及western-blot檢測轉(zhuǎn)染情況;


(5)、轉(zhuǎn)基因的MSCs復合支架的體外培養(yǎng),電子顯微鏡、DNA含量檢測等方法研究細胞支架復合情況;


(6)、構建動物退變椎間盤模型,大體及切片染色檢測退變情況;


(7)、體內(nèi)試驗部分主要通過大體觀察、組織切片、原位免疫熒光、western-blot等方法檢測。




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